禽流感病毒核酸檢測試劑盒（H7N9/熒光探針法）
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禽流感（ Avian influenza ，AI）是禽流行性感冒的簡稱，是由正粘病毒科、流感病毒屬 A 型流感病毒引起的禽類（家禽或野禽，亦有部分哺乳動物）的一種傳染病。禽流感病毒核酸檢測試劑盒（H7N9/熒光探針法），能夠有效精準診斷出是否患有該流感疾病
- 產品描述
【預期用途】
禽流感（ Avian influenza ，AI）是禽流行性感冒的簡稱，是由正粘病毒科、流感病毒屬 A 型流感病毒引起的禽類（家禽或野禽，亦有部分哺乳動物）的一種傳染病。根據禽流感致病力的不同可分為非致病力禽流感（NPAI）、低致病力禽流感（LPAI）和高致病力禽
【適用儀器】A BI 7500、ABI 7300、LightCycler480 等熒光定量 PCR 儀。
【樣本要求】
1. 適用樣本類型：咽喉拭子、泄殖腔拭子、肌肉或臟器樣本等。
2. 樣品采集與前處理（注意無菌操作）
2.1 活禽樣品——取咽喉拭子和泄殖腔拭子，或新鮮糞便拭子，具體采集方法如下：
·咽喉拭子，采取時要將拭子深入喉頭及上腭裂來回刮3～5次，取咽喉分泌液；
·取泄殖腔拭子時，將拭子深入泄殖腔轉一圈沾取糞便；對于易造成損傷的小珍禽，直接用拭子沾取適量新鮮糞便；
·將咽喉拭子和泄殖腔拭子一起放入盛有1.0ml PBS的Eppendoff管中，編號備用。
2.2 內臟或肌肉樣品——用無菌鑷剪夾取待檢樣品2.0g于研缽中充分研磨，再加10ml PBS混勻，或置于組織勻漿器中，加入10 ml PBS
勻漿，然后將組織懸液轉入無菌Eppendoff管中3,000 rpm離心10 min，取上清液轉入Eppendoff管中，編號備用。
同時供應以下試劑（48T/盒）：
甲型流感病毒核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
乙型流感病毒核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
丙型流感病毒核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
季節性流感病毒H1亞型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
季節性流感病毒H3亞型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
甲型H1N1流感病毒（2009）RNA檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
人感染H7N9禽流感病毒核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
禽流感病毒H5亞型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
禽流感病毒H7亞型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
禽流感病毒H9亞型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
甲型流感病毒H2亞型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
甲型流感病毒H4亞型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
甲型流感病毒H6亞型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
甲型流感病毒H8亞型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
甲型流感病毒H10亞型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
甲型流感病毒H11亞型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
甲型流感病毒H12亞型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
甲型流感病毒H13亞型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
甲型流感病毒H14亞型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
甲型流感病毒H15亞型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
甲型流感病毒H16亞型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
甲型流感病毒N1亞型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
甲型流感病毒N2亞型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
甲型流感病毒N3亞型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
甲型流感病毒N4亞型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
甲型流感病毒N5亞型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
甲型流感病毒N6亞型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
甲型流感病毒N7亞型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
甲型流感病毒N8亞型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
甲型流感病毒N9亞型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
禽流感病毒H5N1亞型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
禽流感病毒H5N2亞型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
禽流感病毒H10N8亞型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
乙型流感病毒Victoria譜系核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
乙型流感病毒Yamagata譜系核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
甲型/乙型/甲流H1N1（2009）三通道核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
甲型/乙型流感病毒雙通道核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
甲型流感病毒/禽流感病毒H7亞型雙通道核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
季節性流感病毒H1/H3分型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
甲型H1N1流感病毒（2009）/季節性流感病毒H3亞型雙通道核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
乙型流感病毒Yamagata和Victoria譜系核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
禽流感病毒H5/H7/H9分型三通道核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
副流感病毒通用型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
副流感病毒Ⅰ型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
副流感病毒Ⅱ型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
副流感病毒Ⅲ型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
副流感病毒Ⅳ型核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
副流感病毒分型多通道核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） |
3. 保存與運送
請遵循目前的流感標本采集方案以及標準的流感標本儲存、包裝和運送標準和相應的航空運輸協會的規定。
【檢驗方法】
1.樣本處理和核酸提取（樣本處理區）
建議取 200μl 液態樣本進行核酸提取；組織樣本可以研磨液進行提取操作。可采用中山大學達安基因股份有限公司生產的核酸
提取試劑盒，請按照試劑盒說明書進行操作；也可選擇其他合適的商業化產品。
本試劑盒中的陰性質控品參與提取，用于對環境進行監控；AIV H5 陽性質控品不參與提取，用于 PCR 檢測試劑的質控。
2.PCR 試劑準備（試劑準備區）
從試劑盒中取出 AIV H5 PCR 反應液 A、AIV H5 PCR 反應液 B，室溫融化后振蕩混勻，8,000rpm 離心數秒后使用。
2.1 H5 反應體系配制
取適量 PCR 反應管，每管加入 AIV H5 PCR 反應液 A 17μl、AIV H5 PCR 反應液 B 3μl（也可根據 PCR 反應用量，計算各組分所需總
量，混勻后分裝 20μl 于單個 PCR反應管中）；
3.加樣（樣本制備區）
于上述PCR反應管中分別加入處理后的陰性質控品、待測標本核酸、AIV H5 陽性質控品各5μl，蓋緊管蓋，8,000rpm 離心數秒后轉
移至擴增檢測區。
3.2 ABI Prism 7500 儀器設置（ABI 7500 儀器操作為例，ABI 7300 儀器參照此操作及儀器操作手冊）
3.2.1 打開“Setup”窗口，按樣本對應順序設置陰性質控（NTC）、陽性質控以及未知樣本（Unknown），并在“Sample Name”一欄中設
Start 值可以在 3～15、End 值可設在 5～20，調整陰性對照的擴增曲線平直或低于閾值線），點擊 Analysis 自動獲得分析結果，在 Report
界面察看結果。
4.質量控制
陰性質控品：擴增曲線無對數增長期；
陽性質控品：擴增曲線有明顯對數增長期，且 Ct 值≤32；
以上要求需在同一次實驗中同時滿足，否則，本次實驗無效，需重新進行。
5.結果判定
1. 如果檢測樣品的擴增曲線無對數增長期或 Ct 值＞38，可判樣品為禽流感 H5 亞型陰性；
2. 如果檢測樣品 Ct 值≤38，且曲線有明顯的對數增長期，可判樣品為禽流感 H5 亞型陽性。
【檢測方法的局限性】
樣本檢測結果和樣本收集、處理、運送及保存質量有關，其中任何失誤都將會導致假陰性結果。如果樣本處理時沒有控制好交叉
污染，可能出現假陽性結果。
【產品性能指標】
根據產品分析性能評估結果，本試劑盒的靈敏度為 1.0×10
3 copies/ml。與感染部位相同或感染癥狀相似的其他病原體（副流感病
毒、新城疫病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒等）無交叉反應。
【注意事項】
1.本產品僅用于體外診斷；
2.實驗室管理應嚴格按照 PCR 基因擴增實驗室的管理規范，實驗人員必須進行專業培訓，實驗過程嚴格分區進行（試劑準備區、標
本制備區、擴增和產物分析區），所用消耗品應滅菌后一次性使用，實驗操作的每個階段使用的儀器和設備，各區各階段用品不
能交叉使用；
3.為試劑和標本準備階段提供生物安全柜，實驗過程中穿工作服，帶一次性手套，使用自卸管移液器；
4.試劑使用前要*解凍，8,000rpm 離心數秒后使用；
5.標本制備區所用過的吸頭請打入盛有消毒劑的容器，并與廢棄物一起滅菌后方可丟棄；
6.實驗完畢用 10%次氯酸或 75%酒精處理工作臺和移液器,然后用紫外線燈照射 20－30 分鐘；
7.本試劑盒內陽性質控品應視為具有傳染性物質，操作和處理均需符合相關法規要求：衛生部《微生物生物醫學實驗室生物安全通
用準則》和《醫療廢物管理條例》
具體說明請根據以下信息
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【公司名稱】 廣州健侖生物科技有限公司
【市場部】 楊永漢
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【騰訊 】 2042552662
【公司地址】 廣州清華科技園創新基地番禺石樓鎮創啟路63號二期2幢101-103室
