泰國S&A沙門氏菌診斷血清套裝

沙門氏菌診斷血清套裝（60瓶）

試驗方法

O抗原檢測步驟

       將沙門氏菌接種到非選擇性瓊脂培養基上，35-37℃培養18-24小時。

1. 滴一滴生理鹽水（0.85%氯化鈉）于潔凈載玻片上作為對照。從非選擇性瓊脂培養基平板上取一滿環培養物與載玻片上生理鹽水混合。30S內凝集表明是粗糙型菌株。該菌株不能用于血清學分型。如果不凝集繼續進行血清學分型并記錄。
2. 滴一滴沙門氏菌抗血清于潔凈載玻片的測試區域。從非選擇性瓊脂培養基平板上取一滿環培養物于抗血清上。將培養物與抗血清充分混合，輕輕晃動載玻片1分鐘。如果凝集表明菌株含有這種抗血清中特定的一種O抗原。

說明：

        首先用O多價血清進行凝集，如果菌株與O多價血清發生凝集，則繼續使用O多價血清中包含的相應的群血清進行測定。如果菌株與某一O群血清發生凝集，則繼續使用該群包含的單因子抗血清進行測試。

Vi抗原檢測步驟

       一些傷寒沙門氏菌、丙型副傷寒沙門氏菌和都柏林沙門氏菌可能出現與O抗血清不凝集，必須使用Vi抗血清進行測定。從營養瓊脂（NA）、胰胨大豆瓊脂（TSA）或三糖鐵瓊脂（TSI）上挑取新鮮培養物進行Vi抗血清測定。如果試驗結果顯示此培養物能與Vi抗血清發生凝集反應而不能與O抗血清發生凝集反應，則取兩環培養物懸浮于1mL普通生理鹽水中（NSS0.85%），100℃沸水浴15-60分鐘以破壞Vi抗原。取沉淀物用O抗血清重新進行玻片凝集試驗，應該是顯示陽性結果。

H抗原檢測步驟（Sven Gard技術）

       挑取非選擇性瓊脂培養基上的培養物一環點種于Swarm Agar平板中間，35-37℃培養18-24小時。有動力的菌株在Swarm Agar平板表面蔓延生長。

1. 分別滴一滴生理鹽水和一滴H抗血清于載玻片的兩個測試區域。
2. 用接種環從Swarm Agar點種區邊緣挑取培養物，分別與生理鹽水和H抗血清充分混合。
3. 輕微搖動載玻片30s至1min，觀察反應結果，菌株不應與生理鹽水凝集。
4. 應先依次使用H多價抗血清進行測定。

對試驗結果的解釋

于1分鐘內呈明顯凝集者為陽性，呈均勻乳白色混濁者為陰性。

注意事項

1. 被檢菌應首先用O多價血清及O因子血清鑒定其O抗原，在必要時以Vi血清鑒定其Vi抗原，然后以H血清鑒定其鞭毛抗原，參考沙門氏菌屬診斷抗原表，并根據生化反應特性，做出菌型診斷。
2. 生化反應符合沙門氏菌定義，但與O多價血清不凝集或用本組血清不能定型的菌株，可送往有條件定型的機構，做出菌型鑒定。
3. 血清已用生理氯化鈉溶液稀釋，使用時不必再做稀釋。
4. 防止凍結，在有效期內使用。

包裝和規格

紙盒包裝，每盒60種，共計60瓶（多價血清2Ml/瓶，單因子血清1Ml/瓶）。

沙門氏菌診斷血清套裝（60瓶）

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H抗原常有兩相的變異。*相為特異相，用小寫英文字母表示，如：a、b、I、e、h等；第二相為非特異相，用阿拉伯數字表示，如：1、2、5等，但也有少數菌含有*相中的抗原e、n、x等成分。 為O抗原表面的莢膜抗原。具有該抗原的細菌，由于可阻止O抗原與抗體結合，因此不被相應的O血清凝集。60℃加熱處理或石炭酸處理，雖然該抗原不被滅活，而已從菌體表面脫落，游離于液體中，從而暴露出O抗原，可被O血清凝集。