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韓國SD 惡性瘧/間日瘧抗原檢測試劑盒（膠體金法）

廣州健侖生物科技有限公司

惡性瘧、間日瘧、三日瘧及卵形瘧的四種瘧疾檢測試劑盒

瘧疾（瘧原蟲）抗體、抗原、ELISA檢測試劑、瘧疾（瘧原蟲）快速檢測試劑盒、瘧疾（瘧原蟲）核酸檢測試劑盒（熒光探針PCR）

非洲工作、旅游瘧疾（瘧原蟲）檢測試劑盒

【包裝規格】瘧疾瘧原蟲抗原檢測試劑使用說明書

25人份/盒

保質期：2年

本試劑盒主要是采用膠體金層析的原理制成，用于檢測人體血清/血漿/全血標本中，感染的瘧原蟲抗體，包括了惡性瘧原蟲和間日瘧原蟲、卵形瘧原蟲、三日瘧原蟲共有抗原的鑒別性檢測。

1 撕開檢測卡鋁箔袋，取出袋內金標卡。注意：不要讓袋內材料暴露于高溫高濕環境，撕開鋁箔袋后盡快使用。

2將金標卡平放在臺面上；并將病人名字和編號寫在標簽上。

3 取5微升(吸管*刻度處)全血標本，垂直加入金標卡上“加樣孔A”內。

4 掰斷裂解液瓶子蓋子上方的綠色圓頭，在“樣品孔B”上垂直滴加4滴裂解液。

5 在十五分鐘內出結果。注意：必須在15分鐘內判讀結果，如超時判斷，結果無效。

6 請遵循相關法規，妥善處理樣本及廢棄材料。

7 存儲條件：2-30℃；

8 保質期：18個月；

我司還提供其它進口或國產試劑盒：登革熱、瘧疾、流感、A鏈球菌、合胞病毒、腮病毒、乙腦、寨卡、黃熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團菌等試劑盒以及日本生研細菌分型診斷血清、德國SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產品。

歡迎咨詢2042552662

韓國SD 惡性瘧/間日瘧抗原檢測試劑盒（膠體金法）

【公司名稱】 廣州健侖生物科技有限公司

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【公司地址】廣州清華科技園創新基地番禺石樓鎮創啟路63號二期2幢101-103室

一、材料
1、超純殼聚糖鹽酸鹽（chitosan (CS) hydrochloride salt，Protasan UP CL 113, MW 125 kDa, acetylation degree of 14%）購自Novamatrix (Sandvika, 挪威)；
2、Miglyol 812 (M812)是一種中性油，其成份是由中鏈脂肪酸（6-8 C）組成的甘油三酯，M812是由Sasol Germany GmbH (Witten, Germany)捐贈；
3、乳化大豆L-α-卵磷脂（The emulsifier soybean L-a-lecithin）Epikuron145V由Cargill (Barcelona，西班牙)惠贈；
4、重組乙肝病毒表面抗原（rHBsAg或HB）(MW 24 kDa)由Shantha生物技術公司（Hyderabad，印度）惠贈，抗原蛋白溶于PBS中，蛋白濃度為0.16 mg/ml。
二、溶劑置換法制備殼聚糖納米微囊（CSNC）
按文獻（Prego C, et al. Chitosan nanocapsules as carriers for oral peptide delivery: Effect of chitosan molecular weight and type of salt on the in vitro behaviour and in vivo effectiveness. J Nanosci Nanotechnol. 2006,6: 2921–2928.）的方法進行。
簡言之，將40mg和0.25mL M812溶解在乙醇與丙酮的混合液中。將此有機相倒入含0.05% CS的水溶液中，并不斷進行磁力攪拌，就形成了CSNC，溶液外觀呈乳白色。然后，在真空下將有機溶劑蒸發。溶液在15oC，42000g超速離心1小時，就得到CSNC懸液。后，CSNC懸液用水稀釋到CS的終濃度為1 mg/mL。
Briefly, 40 mg and 0.25 mL of M812 were dissolved in a mixture of ethanol and acetone. This organic phase was poured under magnetic stirring upon an aqueous solution composed of CS 0.05% in water. CSNC were immediately formed, as noted by the milky appearance of the resulting solution. Then, the organic solvents were evaporated under vacuum. Finally, CSNC suspension was isolated by ultracentrifugation (OptimaTM L-90K Ultracentrifuge, Beckman Coulter; Fullerton, CA) at 42000xg for 1 hour at 15oC and then resuspended in water to a final concentration of CS in the formulation of 1 mg/mL.
終制備的CSNC含有由Miglyol 812 (M812)組成的油性核、卵磷脂殼和CS殼的球形結構，表面呈正電荷。CSNC的粒徑約為200nm。 

三、制備攜帶乙肝病毒表面抗原的殼聚糖納米微囊及其理化特性研究。
將HB抗原組裝到CSNC的表面是由強的靜電相互作用實現的， 因為CSNC表面是帶正電荷的多糖，而抗原粒子帶負電荷（水溶液中為220mV）。為了實現這一目的，對HB儲存液進行脫鹽，并通過超濾的方法濃縮到濃度為0.5 mg/mL。處理后的HB溶液立即與CSNC（CS的濃度為1 mg/mL）混合，室溫作用1h。通過2種不同的方法：（1）增加抗原量（25、50、100、250 mg）；（2）維持恒定的抗原量（25 mg），但是改變CSNC的濃度。從而可以制備出不同比例的納米系統，CSNC:HB的比例從1:0.025到1:12.8不等。
CSNC結合HB抗原后，粒徑約為250nm。
四、對結合到CSNC表面的HB抗原進行定量
通過間接方法對結合到CSNC表面的HB抗原進行定理。超速離心 (42000 g，1h，15oC) 后，用ELISA方法檢測上清中的HB抗原量，從而計算出結合到CSNC表面的HB抗原。
五、HB-CSNC的穩定性
1、將HB-CSNC懸浮液放置于4oC。每隔1周取樣進行檢測，共檢測時長為1個月。
2、凍干保存HB-CSNC。利用冷凍干燥法來增加HB-CSNC的穩定性。HB-CSNC以不同的糖作為凍干保護劑（蔗糖和海藻糖），濃度分別為0、1、2.5、5%。HB-CSNC懸浮液和凍干保護劑溶液中按1:1（體積比）混合，分裝在5毫升凍干玻璃小瓶中。小瓶中在-20oC緩慢凍結，然后放置-35oC冷凍。在此溫度下在高真空中進行初步干燥（升華）反應約40小時。第二步干燥（水分解吸）持續8小時，在真空狀態下溫度逐漸上升至20oC。終的凍干品用超純水溫和混合懸浮并分析其物理化學性質。
結果表明：低濃度的糖（0、1、2.5%）作為凍干保護劑，溶解后納米粒子的粒徑顯著增大，而5%濃度的糖作為凍干保護劑，溶解后納米粒子的大小與凍干明相似，沒有顯著差異。
海藻糖（Trehalose）通常是*的生物大分子凍干保護劑，因為它的低吸濕性、容易形成更靈活的氫鍵和非常低的反應性。由于HB-CSNC疫苗中，HB抗原暴露在表面，因此本研究選擇海藻糖作為HB-CSNC的凍干保護劑。