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利什曼原蟲AB抗體ELISA法診斷試劑盒

廣州健侖生物科技有限公司

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利什曼原蟲AB抗體ELISA法診斷試劑盒

試驗原理

間接法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知 LSM-Ab 濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測。先將 LSM-Ab 和標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親

和素標(biāo)記過的 HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物 A、B，和酶結(jié)合物同時作

用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中 LSM-Ab 的濃度呈比例關(guān)系。

自備材料

蒸餾水。

加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性

避免直接接觸終止液和底物 A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。

實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

操作注意事項

試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物 A、B 液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。

使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

底物 A 應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物 B 對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實

驗完成后應(yīng)立即讀取 OD 值。

加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。

按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

樣品收集、處理及保存方法

血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g 離心 10 分鐘

將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g 離心 30 分鐘去除顆粒。

細(xì)胞上清液---1000×g 離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。

保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血

脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在 37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并

確保樣品均勻地充分解凍。

試劑的準(zhǔn)備

標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備，不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。

洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水 50 倍稀釋。

操作步驟

使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤

差。

根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自

己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。

加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品 50ul 于反應(yīng)孔、加入待測樣品 50ul 于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入 50ul 的標(biāo)記的抗體。

蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育 1 小時。

甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩 30 秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作 3 次。如果用洗板機

洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

每孔加入 80ul 的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育 30 分鐘。

甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩 30 秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作 3 次。如果用洗板機

洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。

每孔加入底物 A、B 各 50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育 10 分鐘。避免光照。

取出酶標(biāo)板，迅速加入 50ul 終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。

在 450nm 波長處測定各孔的 OD 值。

以下是我司出售的部分傳染病產(chǎn)品：

斑氏絲蟲抗原 ELISA kit
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墨西哥利什曼原蟲 IgG kit
杜氏利什曼原蟲 IgG kit
隱孢子蟲/賈第蟲抗原直間接免疫熒光檢測試劑盒
隱孢子蟲抗原直接免疫熒光檢測試劑盒
犬利氏曼原蟲 IgG ELISA kit
泛瘧抗原（pLDH) ELISA kit
泛瘧抗原（pLDH) ELISA kit
惡性瘧原蟲抗原（HRP2)ELISA kit
惡性瘧原蟲抗原（HRP2)ELISA kit
溶組織內(nèi)阿米巴抗原ELISA kit
賈地蟲抗原ELISA kit
絲蟲 IgG ELISA kit
犬弓蛔蟲 IgG ELISA kit
克氏錐蟲IgG ELISA kit

利什曼原蟲抗體定性檢測試劑（黑熱病）

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